體電鏡是通過超快自動多束電子顯微鏡掃描連續(xù)切片組合三維立體圖像,通過常規(guī)及冷凍超薄動力型切片機手段切割,它是一種廣泛應(yīng)用于生物、材料和醫(yī)學領(lǐng)域的設(shè)備,其主要作用是將樣品(如動物、植物、材料等)冷凍后進行切割,以獲得一定精度和電鏡數(shù)據(jù)處理的切片結(jié)果。在本文中,我們將介紹冷凍切片機的原理及其工作方式。
體電鏡的原理基于生物及材料在冷凍狀態(tài)下變硬的特性,使得切割更加容易。在切割過程中,樣品首先被置于切片機的加持器上,然后通過主機內(nèi)部馬達軸承輸送到鉆石刀刃切割區(qū)域。樣品經(jīng)過預冷和冷凍后,達到合理的硬度,進一步在特制的鉆石刀上,切割所需大小和形狀的切片,通過特殊的導電材質(zhì)收集連續(xù)切片,進行后續(xù)軟件數(shù)據(jù)處理。
冷凍切片機采用冷卻劑將切片區(qū)域降溫至-175°C左右,將樣品冷凍,從而增加軟性樣品的硬度。通常情況下,冷卻劑為氮冷劑,它可以在較低的溫度下蒸發(fā),從而提供所需的冷卻能力。此外,還可以使用液態(tài)氮或二氧化碳等其他冷卻劑。
在冷卻后的樣品到達刀片區(qū)域之前,其通常需要經(jīng)過一個預冷區(qū)域。預冷區(qū)域通常使用強制空氣冷卻或水冷卻的方式將物料降溫至-5°C左右。這可以使物料進一步變硬,并且可以減少物料在切割過程中的破損率。
在物料到達刀片區(qū)域后,它們被放置在旋轉(zhuǎn)的刀片上。刀片通常具有可調(diào)節(jié)的旋轉(zhuǎn)速度,并且可以根據(jù)需要更換不同形狀和大小的刀片。刀刃的材料也是關(guān)鍵因素之一,通常選用高硬度、高耐磨的合金鋼或者陶瓷材質(zhì)來制作刀刃。
當樣品與刀刃接觸時,刀片會將其切割成所需的形狀和大小。在這個過程中,樣品的硬度和厚度對其切割結(jié)果有著重要的影響。如果樣品太軟或太硬,可能會導致破損或不均勻的切割效果。因此,在切割過程中,需要保持樣品的硬度和軟硬恰當。
通過銅網(wǎng)或條帶,將所得到的超薄切片存放收納盒后在進行后續(xù)的軟件處理。通常,這些低溫切片需要保持在低溫狀態(tài)下,并經(jīng)過化學試劑封裝、冷凍,染色等步驟,以達到實驗目的獲取結(jié)果。
總之,冷凍切片機是一種利用樣品在冷凍狀態(tài)下變硬的特性,通過預冷和冷卻劑制冷降溫,以獲得一定精度和效率的切割結(jié)果的設(shè)備。它廣泛應(yīng)用于生物,材料和醫(yī)學領(lǐng)域,可以大幅提高研究效率和結(jié)果質(zhì)量。